核心概念
生物學
生物化學
酶
生理學
化學
引言
你有沒有想過你吃的所有食物是如何被消化的?不僅僅是胃裡的酸分解你的食物——你體內許多被稱為酶的小分子也有助於消化。酶是特殊型別的蛋白質,它們加速化學反應,例如胃中食物的消化。事實上,你的體內有數千種不同的酶,它們晝夜不停地工作,以保持你的健康和活力。在這個科學活動中,你將研究其中一種叫做過氧化氫酶的酶,以瞭解它是如何幫助保護你的身體免受傷害的。
背景
酶對我們的生存至關重要。這些由我們的細胞產生的蛋白質,有助於轉化我們體內的化學物質,充當催化劑。催化劑啟動反應並使它們更快發生,透過提高反應速率,否則這些反應可能根本不會發生,或者需要太長時間才能維持生命。然而,催化劑本身並不參與反應——那麼這是如何工作的呢?每個化學反應都需要最少的能量才能發生。這種能量被稱為活化能。反應的活化能越低,發生的速度就越快。如果活化能太高,反應就不會發生。
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酶能夠透過與其反應物(參與反應的化學物質)相互作用來降低化學反應的活化能。每種酶都有一個活性位點,反應發生的地方。這些位點就像特殊的口袋,能夠結合化學分子。酶與之反應的化合物或分子被稱為其底物。酶口袋具有特殊的形狀,因此只有一種特定的底物能夠與其結合,就像只有一把鑰匙適合特定的鎖一樣。一旦分子與酶結合,化學反應就會發生。然後,反應產物從口袋中釋放出來,酶就可以用另一個底物分子重新開始了。
過氧化氫酶是一種非常常見的酶,幾乎存在於所有暴露於氧氣的生物體中。過氧化氫酶在活細胞中的作用是保護它們免受氧化損傷,當細胞或體內其他分子與氧化化合物接觸時可能會發生氧化損傷。這種損傷是細胞內發生的反應的自然結果。這些反應可能包括諸如過氧化氫之類的副產物,過氧化氫可能對身體有害,就像美好的篝火的副產物可能是不受歡迎的煙霧,會讓你咳嗽或刺痛你的眼睛一樣。為了防止這種損害,過氧化氫酶透過將過氧化氫 (H2O2) 分解為無害的水和氧氣來幫助清除這些化合物。你想看看過氧化氫酶的作用嗎?在這個活動中,你將在酵母過氧化氫酶的幫助下解除過氧化氫的武裝。
材料
安全護目鏡或防護眼鏡
五茶匙洗碗液
一包乾酵母
過氧化氫,3%(至少 100 毫升)
三湯匙
一茶匙
五個 16 盎司一次性塑膠杯
自來水
量杯
永久性記號筆
紙巾
可以被弄溼的工作區域(不會被任何灑出的過氧化氫或有色水損壞)
食用色素(可選)
準備工作
取一個杯子,將乾酵母溶解在約半杯溫熱自來水中。水不應太熱,但應接近體溫(37 攝氏度)。讓溶解的酵母靜置至少五分鐘。
用永久性記號筆將剩餘的四個杯子從一到四標記。
在所有標記的杯子中,加入一茶匙洗碗液。
此時,杯子一中不再新增其他物質。
在使用過氧化氫之前,戴上安全護目鏡以保護您的眼睛。如果您灑出過氧化氫,請用溼紙巾擦乾淨。如果沾到您的皮膚上,請確保用大量的水沖洗受影響的區域。
在杯子二中,加入一湯匙 3% 過氧化氫溶液。使用一個新的勺子盛放過氧化氫。
在杯子三中,加入兩湯匙過氧化氫。
在杯子四中,加入三湯匙過氧化氫。
或者,您可以向每個標記的杯子中新增一滴食用色素。(您可以為每個杯子選擇不同的顏色,以便於識別)
步驟
拿起一號杯,將其放在您面前的工作區上。用一個乾淨的湯匙,向杯中加入一湯匙溶解的酵母溶液並稍微攪拌一下。加入酵母后會發生什麼?你看到有反應發生嗎?
將二號杯放在您面前,再次向杯中加入一湯匙酵母溶液。一旦加入酶,過氧化氫酶會與過氧化氫發生反應嗎?你能看到反應產物正在形成嗎?
向三號杯加入一湯匙酵母溶液。你看到同樣的反應發生嗎?與二號杯相比,結果是不同的還是相同的?
最後,向四號杯加入一湯匙酵母溶液。與您之前的實驗結果相比,您看到的反應產物更多還是更少?您能解釋其中的差異嗎?
將所有四個杯子彼此相鄰地放在您面前,並觀察您的結果。酶促反應是否在所有杯子中都發生,還是存在例外?每個杯子中的結果看起來有什麼不同?您認為這是為什麼?
現在,拿起一號杯,向杯中加入一湯匙額外的 3% 過氧化氫。稍微攪拌一下杯子以混合溶液。現在發生了什麼?縱觀您的所有實驗結果,您認為您杯子中過氧化氫酶反應的限制因素是什麼?
額外:重複此活動,但這次不要向所有反應中新增洗碗液。一旦去除洗碗液,會有什麼不同?您仍然看到泡沫形成嗎?
額外:到目前為止,您已經觀察到底物 (H2O2) 濃度對過氧化氫酶反應的影響。如果保持底物濃度不變但改變酶的濃度會發生什麼?嘗試向三湯匙過氧化氫中新增不同量的酵母溶液,從一茶匙開始。您觀察到任何差異嗎,或者過氧化氫酶的濃度在您的反應中是否無關緊要?
額外:如果酶的環境條件發生變化會發生什麼?重複過氧化氫酶反應,但這次改變條件,例如透過新增醋(一種酸)或小蘇打(一種鹼)來改變 pH 值,或者透過在微波爐中加熱溶液來改變反應溫度。您能確定哪些條件對於過氧化氫酶反應是最佳的嗎?是否存在任何消除過氧化氫酶活性的條件?
額外:您能找到可以在此活動中使用的其他過氧化氫酶來源嗎?研究哪些其他生物體、植物或細胞含有過氧化氫酶,並嘗試將其用於您的反應。它們和酵母的效果一樣好嗎?
觀察和結果
您可能在此活動中看到了大量的氣泡和泡沫。是什麼讓泡沫出現的?當酶過氧化氫酶與其底物過氧化氫接觸時,它開始將其分解為水和氧氣。氧氣是一種氣體,因此想要逸出液體。然而,您新增到所有溶液中的洗碗液能夠捕獲氣泡,從而形成穩定的泡沫。只要溶液中存在酶和過氧化氫,反應就會繼續,併產生泡沫。一旦其中一種化合物耗盡,產物的形成就會停止。如果您不向反應中新增洗碗液,您會看到產生氣泡,但不會形成穩定的泡沫。
如果沒有過氧化氫,過氧化氫酶就無法發揮作用,這就是為什麼在一號杯中您不應該看到任何氣泡或泡沫產生。只有當過氧化氫存在時,過氧化氫酶反應才能發生,正如您可能在其他杯子中觀察到的那樣。事實上,過氧化氫酶反應依賴於底物濃度。如果您有過量的酶,但底物不足,則該反應將受到底物可用性的限制。一旦您向溶液中新增更多的過氧化氫,反應速率就會增加,因為更多的底物分子可以與酶碰撞,形成更多的產物。結果是隨著您增加反應中 H2O2 的量,您的杯子中產生的泡沫量會增加。一旦您向一號杯中新增另一湯匙過氧化氫,您應該會看到產生更多的泡沫,這應該導致與二號杯中相似的泡沫量。然而,在某個時候,您將達到一個底物濃度,在該濃度下,酶會飽和併成為限制因素。在這種情況下,您必須新增更多的酶才能再次加速反應。
許多其他因素也會影響酶的活性。大多數酶僅在最佳環境條件下起作用。如果 pH 值或溫度偏離這些條件太多,酶反應會顯著減慢或根本不起作用。您可能在執行步驟中的額外步驟時已經注意到這一點。
清理
將所有溶液倒入水槽中,並用溫水和洗碗液清潔所有勺子。用溼紙巾擦拭您的工作區域,並用肥皂和水洗手。
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